如何冷凍保存未受精卵?
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根據有關文獻報道,經冷凍保存的未受精人卵已有若干例成功受孕。與冷凍胚胎相比,未受精人卵的冷凍成功率很低。然而在臨牀上未受精卵的應用與冷凍胚胎相比,想必是一個更佳的選擇。目前對於接觸冷凍保護劑並經凍融的卵子,擔心其受精後形成的胚胎會增加染色體異常的危險性。
在理論上這種擔心起源於以下事實:排卵前期的卵子是在第二次減數分裂的中期形成的,所以染色體仍附着減數分裂的紡錘體。一般認爲紡錘體對溫度甚爲敏感。故在這種情況下卵子被冷卻時有被極化可能,當發生受精時會干擾姐妹染色單體的分離。這種極化作用在排出第二極體後可導致染色體不分離,併產生非整倍染色體。據報道應用小鼠卵子進行的實驗中經凍 /融的卵子,其多倍體發生率增加,但是非整體發生程度與新鮮卵子相同。經凍 /融的卵子受精後形成的胚胎,移植到假孕小鼠後與未冷凍卵子相比,其正常發育的比例相同。
有關冷凍保存未受精卵的標準方法學尚未被認可。冷凍保存人卵,通常用 DMSO,但其凍 /融速度各家報道不一。首例人卵冷凍後成功受孕者是用 1.5mol/L 的 DMSO 將卵子緩慢冷卻到 -36℃ ,然後快速融解所致。Dietrich等報道的方法與上述相似,也是用 DMSO,緩慢冷卻到 -30℃ ,然後快速融解。Trounson等的方法系使用 3mol/L 的 DMSO 和蔗糖作爲冷凍液,2~ 6min後快速冷凍及融解。使用超速冷凍技術至今還沒有很成熟的經驗。
透明化可能會提供一種更好的卵子保存方法。但是該技術用於人卵保存的臨牀經驗有限,有待進一步完善。分析用冷凍人卵而獲妊娠成功的 5個病例數據,其經驗有侷限性,最佳方法還有待確認。將來超速冷凍的應用和(或)透明化程序的改進可能會使卵子保存技術用於臨牀實踐。對於面臨喪失卵巢功能的年輕女性或因年齡關係希望在喪失受孕能力前保存卵子的女性,這是一個有效的保存生育能力的方法
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